2013, 37(8): 925-928.
目的:建立检测脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)大鼠局部浸润巨噬细胞亚群的流式细胞术方法。方法:取5只健康雌性SD大鼠,采用纽约大学SCI撞击仪系统制作重物坠落SCI模型为SCI组;另设5只假手术大鼠为假手术组。SCI术后7 d收集损伤的脊髓,制备单细胞悬液,采用Percoll原液密度梯度离心法浓缩浸润的巨噬细胞。分别以CD68与CD86或CD163的不同荧光标记抗体组合作为鉴定M1和M2型巨噬细胞的标志,用流式细胞术检测损伤局部巨噬细胞亚群的变化。结果:假手术组大鼠脊髓单细胞悬液中,CD68+细胞占细胞总数的(0. 070. 02)%,CD86+细胞和CD163+细胞分别占CD68+细胞的(9. 903. 28)%和(4. 950. 17)%;而SCI组大鼠脊髓单细胞悬液中,CD68+细胞的百分比为(0. 210. 09)%,CD86+细胞和CD163+细胞分别占CD68+细胞的(18. 710. 49)%和(27. 073. 74)%,差异均有统计学意义(P0. 05~P0. 01)。结论:以小鼠抗大鼠CD68、小鼠抗大鼠CD86、小鼠抗大鼠CD163为标志,采用流式细胞术可以成功检测SCI局部浸润的M1和M2型巨噬细胞亚群。